病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片弯曲且不能形成直带
●原因:①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。
●解决方法:①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。③修整组织块时,注意修切整齐。④移动切片刀,更换刀口位置。2.切片上出现裂纹
●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质,如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。
●解决方法:①切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质太多,则不宜用。③纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层,即可放入冷水中。南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。
TTC染色是TTC和活细bao线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞,用来表示细胞的活力。配制多为2%,染色要避光,37度条件下,它是评价脑缺血损伤常用的指标。
TTC(2,3,5—氯化三苯ji四氮唑)是脂溶性光敏感复合物,1894年刚开始合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡定—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。
TTC可以被活细bao中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物,所以活组zhi部分呈现粉红色,而si亡的细胞的还原酶的活力已经消失,因此TTC不能被还原,所以si亡的组织呈现白色。
病理实验外包,病理染色fish染色介绍,雅安染色,荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization),简称FISH。 是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交,通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号,来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。FISH常使用的靶序列是16S rRNA,根据rRNA目标区域可设计寡核苷酸探针,进行种属特异性鉴定;将处理好的样品置于荧光显微镜下,选择分散较好的区域来观察。三色(或者更多)荧光激发下,观察到不同颜色的荧光图像。通常选用20X物镜来扫描样品杂交区域,尼氏染色,40X或100X物镜下观察样品,从一定的方向进行计数,并对计数情况进行分析。南京英瀚斯,病理染色实验服务平台。
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