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河南细胞 英瀚斯 转染

发布日期 :2022-10-08 12:39发布IP:123.58.44.124编号:10546439
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关于细胞冻存的注意事项:

1. 为保持细胞大存活率,一般都采用慢冻存融的方法。

2. 冻存物距液氮面越近温度越低。标准的低冻速度为-1℃~12℃/ 分钟,当温度下降达-25℃时,下降速度可增至-5~-10℃/ 分钟,到-100℃时则可迅速冻入液氮中。因此要适当掌握冻存物下降入液氮中的速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促冰晶形成。

3. 初次冻存者在下降冻存时,宜先用细木棒伸入罐中探测液面位置,然后需用温度计与冻存物并行的办法,以观测下降冻存物的速度、冻存物与液氮液面距离和温度三者关系,当已掌握以上各参数和冻存技术熟练后,仅按下降时间和下降距离便可获理想冻存效果。





软gu细胞培养

(1)豚鼠脱颈处死,备皮,用75%酒精消毒背部及四肢皮肤。

(2)无菌操作下取下双侧股骨头及膝关节(保留周围肌肉,软gu不能暴露),75%酒精浸泡5分钟,转移至PBS缓冲液中,带入超净工作台,剔除关节周围附着的软组织,打开髋、膝关节,用尖刀削取关节软gu组织,转染,置入装有PBS缓冲液的无菌培养皿,防止软gu组织被风干。

(3)PBS缓冲液充分漂洗软gu小块3次,细胞培养技术,然后用小剪刀将软gu块切碎至约Imm3大小。

(4)再次用PBS缓冲液冲洗3次,滤干,将细小的软gu块置入放有0.2%的II型胶原酶3ml的广口瓶里,摇匀后置于37°C恒温震荡箱中消化,40分钟后将上层消化液转移至15ml规格离心管中,800r/min离心5min,收集细胞(沉淀物),加入含10%的胎牛xue清DMEM培养液4ml并吹打混匀,制成软gu细胞混悬液。

(5)把消化所得的软gu细胞混悬液收集于离心管中,经滤网过滤后用细胞计数板计数,并把细胞混悬液密度调整为2x105/ml接种于25cm2规格的培养瓶中。将培养瓶放置于CO2培养箱内。培养条件为37°C、5%CO2。

(6)未消化完的软gu小块继续用II型胶原酶如_上法消化,直至软gu块基本消失。

(7)每日在倒置显微镜下观察软gu细胞生长情况并拍照保存。





细胞检测服务

作为生物体结构和功能的基本单位,细胞在机体的各项新陈代谢的生命活动中发挥着重要的作用,与此同时,细胞的生理过程,在一定程度上也是机体生命活动的反应。因此利用多种精密仪器,结合特异性的检测试剂,河南细胞,对体外培养的细胞直接检测其增殖的基本过程,或对细胞进行不同的处理后检测细胞生活周期内各项指标的变化,从而深入揭示细胞新陈代谢的具体机制。








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