细胞生物学服务
南京英瀚斯生物科技公司自建有标准的细胞培养房,配备有生物安全柜、超净工作台、细胞三气培养箱、二氧化碳细胞培养箱、荧光倒置显微镜、体视镜、、流式细胞仪等设备。细胞组技术人员毕业于东南大学、华中科技大学等高校生物学相关,细胞培养技术,具有硕士研究生以上学历,熟练掌握细胞学相关实验,可开展多种细胞实验。动物实验外包选英瀚斯生物科技有限公司。
4. 各种细胞对冻存速度的要求也不一样;上皮细胞和成纤维细胞耐受性可能大些,-2~-3℃/ 分钟合适;胚胎细胞耐受性较小,不宜太快。总之在一开始时,下降速度不能超过-10℃/ 分钟。
5. 用什么防护剂合适和用量多大,细胞实验外包,要依细胞而定,初代培养细胞用 DMSO 较好,一般细胞可用甘油;用量以较小为好。有人认为肤上皮细胞贮存在 20%-30% 甘油中很好。
6. 原则上细胞在液氮中可贮存多年,但为妥善起见,衢州细胞,冻存一年后,应再复苏培养一次,流式细胞检测结果分析,然后再继续冻存。
7. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免
8. 注意自身的安全,对于来自人源性或病毒的细胞株应特别小心。操作过程中,应避免引起气溶胶的产生,小心有毒性试剂例如 DMSO,并避免尖锐物品伤人等。
脂质体瞬时转染
1、细胞H9C2 (Hela) 6孔板Hela1x10°/孔。
2、转染前换上没有抗sheng素的DMEM 胎清(10%)。
3、将质粒DNA (约2-4ul) 2ul 加入dorf管中 DMEM至50u1。
4、脂质体5ul补培养基至50ul混匀静止5分钟(质粒与脂质体比例为1:2或1.5:2.5)。
5、将含有脂质体的培养基与含质粒的混合总体积100ul室温放置30分钟。
6、吸取混合物均匀加入每一个孔中。
7、将6孔板放入培养箱中继续培养6小时后吸出培养基换上新配置的培养基DMEM6ml 胎清600u1 三抗300u1。
8、培养24小时。
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