一、实验材料
LPS（Sigma公司）
SD大鼠（6周龄）
二、实验方法
SD大鼠用10%水合氯醛，仰卧固定于操作台，使用手术剪剪开颈部皮肤，暴露气管，将LPS（1mg/kg）注入气管，饲养三周。
5. 剥夺杆睡眠剥夺法
在标准实验室笼中采用间隙性的剥夺杆扫描进行触觉刺激来干扰自由行为的小鼠。该方法防止了人类接触和干预对睡眠剥夺的影响，并且在整个睡眠剥夺过程期间小化身体活动。此外，该程序准确且可预测。实验室动物从小都是在饲养笼中长大，基于实验室饲养笼使得动物能够保持在正常的社会环境中实施了一种相对无压力的方法来诱导动物睡眠剥夺模型，从而避免了外界环境及其他因素对睡眠剥夺的影响。此外，基于饲养笼式的睡眠剥夺仪易于组装和清洗，设计更加地人性化。
注意事项
1. 针头大小与动物的种类有关，动物模型构建公司，t 同时针头一定要磨钝。
2. 检查灌注泵的运作情况，一定排出管子的气泡和空气，防止空气栓塞。
3. 经腹腔暴腔，先清楚升主动脉外面的脂肪组织和心外膜组织。
4. 将针头经左心室插入升主动脉（颜色变白的哦），温州动物模型，并用钳子固定。
5. 解开右心耳，同时开启灌注泵。注意，不要随便揭开心脏的其他部位，否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功，基因敲除小鼠，尤其。
6. 将 4 度的生理盐水（好已动物的发白为标准，我们实验室的大鼠约用 250ml）和多聚甲醛 (根据所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整个过程均应将动物放在冰上，以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。
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