病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片弯曲且不能形成直带
●原因:①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。
●解决方法:①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。③修整组织块时,注意修切整齐。④移动切片刀,更换刀口位置。2.切片上出现裂纹
●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质,如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。
●解决方法:①切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,扫描电镜,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质太多,则不宜用。③纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层,即可放入冷水中。南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。
病理实验外包常见的病理染色实验是组化染色,用标记的特异性对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞的定性、定位或定量研究,这种技术称为组织化学(immunohistochemistry)技术或细胞化学(immunocytochemistry)技术。根据抗原反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,通过显色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原反应产物,扫描电镜实验报告,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。组化的特点是特异性强、定位准确,因此能够明确目的蛋白的细胞定位、亚细胞定位及多种蛋白之间的相互位置关系。组化在医学上应用广泛,尤其在临床诊断和鉴别诊断中具有普遍认可的实用价值。其应用于低分化或未分化的鉴别诊断时,准确率可达50% -75%。
病理实验外包,染色常见染色介绍天狼星红染色:主要由天狼星红染色液、Mayer 素染色液组成,主要用 于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组 织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助 作用。采用组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用昂贵,扫描电镜原理,操作费时,而采用 天狼星红染色试剂便宜,操作简单。
天狼星红染色液操作步骤
1、组织固定于 10%固定液,常规脱水包埋。
2、切片厚 6μm,透射电镜和扫描电镜的区别,常规脱蜡至水。
3、天狼星红染色液滴染 1h。
4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。
5、Mayer 素染色液染细胞核 8~10min。
6、流水冲洗 10min。
7、常规脱水透明,中性树胶封固。 天狼星红染色可用作肝纤维化以及纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。
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