yao物对细胞的IC50检测
IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药wu诱导肿liu细胞凋亡50%,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量yao物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对yao物的耐受程度。
血管生成技术
一、服务介绍
zhong瘤血管生成是一个极其复杂的过程,一般包括包括血管内皮基质降解、内皮细胞移行、内皮细胞增殖、内皮细胞管道化分支形成血管环和形成新的基底膜等步骤。由于zhong瘤组织这种新生血管结构及功能异常,且血管基质不完善,这种微血管容易发生渗漏,细胞实验外包公司,因此肿liu细胞不需经过复杂的侵袭过程而直接穿透到血管内进入血流并在远隔部位形成转移。
血管生成(Angiogenesis)是指源于已存在的mao细血管和毛xi血管后微静脉新的mao细血管性血管的生长。无论原发性zhong瘤还是继发性zhong瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于zhongt瘤细胞自身可分泌多种生长因子,细胞实验外包费用,诱导血管生成。
大鼠gu髓间充质gan细胞的分离
操作方法
(1 )取SD大鼠( 2周龄),颈椎脱臼法处死后立即用75%乙醇浸泡,移入超净工作台内,用大头针固定大鼠四肢于工作台面的泡沫板上。
(2)碘酒擦拭四肢,再用酒精棉球擦拭,无菌条件下用灭菌消毒后的镊子和剪刀分离出大鼠股骨和胫骨,剔除骨头表面肌肉,细胞实验外包, PBS溶液冲洗两遍。
(3 )从中间剪断股骨和胫骨,用2ml无菌注she器吸取DMEM/F 12溶液冲出gu髓细胞多次,再用针头吹打,吸管吸入离心管内,1000r/min离心5min,弃上清,用PBS重悬细胞。
(4 )缓慢将细胞悬液加入预先装有5mL淋巴细胞分离液的15mL离心管内,保持细胞悬液在淋巴细胞分离液上层,注意不要搅动液面,保持二者分层界面。
(5 ) 2000rpm离心15-25min,离心后溶液分4层,汉中细胞实验,吸取中间骨sui基质细胞层(白色浑浊状), PBS洗三次。
(6)用含15%胎牛xue清及青链mei素的DMEM/F 12以106/mL的细胞浓度接种于25cm2培养瓶中, 置37°C、5%CO2恒温培养箱中培养。
( 7 ) 24小时后弃去培养液(看细胞贴壁情况),PBS冲洗2-3次去除末贴壁细胞,加入培养液继续培养。以后每3d半量换液1次,-般10d细胞生长融合。
(8 )经0.25%胰酶消化,1 : 2传代,其后一般3-5d传代1次,选取生长良好的第三代细胞进行后续实验。
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