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细胞实验 南京英瀚斯生物科技 细胞实验外包

发布日期 :2023-04-10 11:58发布IP:123.58.44.124编号:11645489
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细胞生物学服务

南京英瀚斯生物科技公司自建有标准的细胞培养房,配备有生物安全柜、超净工作台、细胞三气培养箱、二氧化碳细胞培养箱、荧光倒置显微镜、体视镜、、流式细胞仪等设备。细胞组技术人员毕业于东南大学、华中科技大学等高校生物学相关,具有硕士研究生以上学历,细胞实验外包,熟练掌握细胞学相关实验,可开展多种细胞实验。动物实验外包选英瀚斯生物科技有限公司。












透射电镜自噬小体检测

胰酶消化,收集作用后的细胞,离心,先将细胞块固定在2.5%成二醛和0.1%的PBS溶液中保存在4C中过夜。

再用乙醇梯度脱水,接下来用环氧树脂浸透并切成薄片。随后超薄切片用铜网固定,后用重金属醋酸双氧铀和柠檬酸铅染色。通过TEM分析凋亡细胞内超微结构变化,拍照保存。

贴壁细胞:先倒出培养液,采用胰蛋白酶消化或者用细胞刮(会产生碎屑)刮下:带培养液进行离心,100-1500/mim 5 10min。离心完毕倒出培养液。管底的细胞团不要打散, 沿管壁倒入适量(一般为材料体积的5-10倍)的2.5-3.5%成醒固定液,固定约1h-2h. 也可在4C冰箱过夜。






细胞转染实验

目的

学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,细胞实验外包选哪家,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。


实验原理



上图所示是脂质体介导转染的示意图,它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。

外源基因进入细胞主要有四种方法:法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒细胞的方法使得其进入细胞。但是由于法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。

利用脂质体转染法重要的就是防止其毒性,细胞实验,因此脂质体与质粒的比例,细胞密度以及转染的时间长短和培养基中的含量都是影响转染效率的重要问题,通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有巨大的作用。



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